期刊简介

               本刊主要是报道国内肝病领域的临床研究基础理论研究的成果,交流中西医结合的临床经验,介绍肝病新技术的重要发展并开展国际及国内学术交流活动。为肝脏病学的医疗、教学和科技提供学术交流的园地。进一步提高广大医务人员肝病的诊治和预防研究水平。                

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  • 杂志名称:肝脏杂志
  • 主管单位:上海市卫生局
  • 主办单位:上海市医学会
  • 国际刊号:1008-1704
  • 国内刊号:31-1775/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中)
肝脏杂志2001年第04期

不同方法抽提血清HBV DNA得率的比较

徐文胜;缪晓辉;潘怡;吴文雅;孔宪涛

关键词:肝炎病毒, 乙型, 基因检测, 聚合酶链反应, 抽提方法
摘要:目的比较不同的HBV DNA抽提方法对PCR产物量的影响.方法将HBV DNA阳性血清及投入了HBV DNA质粒的HBV DNA阴性血清,分别采用7种不同方法抽提核酸.抽提物作PCR后,产物行琼脂糖凝胶电泳,并对阳性扩增条带进行密度定量.结果血清直接煮沸法、经典的蛋白酶裂解加酚/氯仿抽提法、蛋白酶裂解加酚/氯仿抽提法省缺乙醇沉淀和柱抽提法的HBV DNA抽提得率分别为75 2%、13.8%、21.9%和31.0%;用碱变性裂解和蛋白酶裂解后煮沸所得上清液,以及血清直接作为模板,行PCR后不能得到阳性扩增条带.结论核酸抽提方法选择不当能直接影响基因检测的灵敏度,导致基因定量准确性下降.血清直接煮沸法抽提HBV DNA得率高、操作简便、省时和经济,值得推荐.