期刊简介
本刊主要是报道国内肝病领域的临床研究基础理论研究的成果,交流中西医结合的临床经验,介绍肝病新技术的重要发展并开展国际及国内学术交流活动。为肝脏病学的医疗、教学和科技提供学术交流的园地。进一步提高广大医务人员肝病的诊治和预防研究水平。
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- 杂志名称:肝脏杂志
- 主管单位:上海市卫生局
- 主办单位:上海市医学会
- 国际刊号:1008-1704
- 国内刊号:31-1775/R
- 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中)
抗结缔组织生长因子小分子干扰RNA设计、合成及活性鉴定
李光明;史毅;李定国;谢青;徐芹芳;金由辛
关键词:结缔组织生长因子, 小分子干扰RAN, 肝星状细胞
摘要:目的设计、合成及筛选高效抗肝纤维化关键基因--结缔组织生长因子(CTGF)的小分子干扰RNA(siRNA).方法应用RNA设计软件,模拟SD大鼠CTGF mRNA二级结构,设计并合成针对CTGF mRNA 483、885及946位点的三对21核苷酸(nt)siRNA,转染肝星状细胞系(HSC T6),以空白及转染非特异siRNA(与CTGF mRNA无同源性的21nt siRNA)作为对照,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测HSC T6细胞CTGF mRNA表达.结果与对照相比,转染siRNA的HSC T6细胞CTGF mRNA明显下调,在50~200nmol/L范围,CTGF mRNA下调幅度呈浓度依赖性增加,以483 siRNA 200nmol/L显著,转染非特异siRNA的HSC T6细胞CTGF mRNA表达水平无明显变化.转染483 siRNA的HSC T6细胞24、48及72 h CTGF mRNA分别较对照下调91%±2%、65%±3%(t=78.82,37.53,P均<0.01)和10%±7%(t=2.55,P=0.06),在24~72 h范围,CTGF mRNA下调幅度呈时间依赖性降低.结论成功筛选到能高效阻抑CTGF表达的483 siRNA,其有效阻抑时间约72 h,有望通过介导CTGF mRNA剪切而抑制肝纤维化的发生与发展,可发展为新一代防治肝纤维化的核酸药物.
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