慢性乙型肝炎患者肝组织HBV cccDNA、总HBV DNA与血清HBV DNA的相关性及其与临床的关系

摘要：目的 探讨慢性乙型肝炎患者肝组织HBV共价闭合环状DNA(cccDNA)、肝组织总HBV DNA( HBV tD-NA)与血清HBV DNA之间的相关性及其与临床的关系.方法 78例慢性乙型肝炎患者入选本研究.肝组织β- globin DNA、HBV cccDNA和HBV tDNA采用实时荧光定量PCR方法检测,平均每个肝细胞HBV cccDNA和HBV tDNA含量(拷贝/cell)=HBV cccDNA(实测值)/β- globin DNA(实测值)和HBV tDNA(实测值)/β- globin DNA(实测值),肝组织HBV cccDNA和HBV tDNA含量的计算单位定义为log10拷贝/10°cell;采用实时荧光定量PCR、ELISA法检测血清HBV DNA和HBV标志物；采用免疫组织化学方法检测肝细胞中HBsAg和HBcAg的表达.统计分析采用pearson相关分析及t检验.结果 (1)肝组织HBV cccDNA与HBV tDNA定量呈正相关(r=0.696,P＜0.001)；肝组织HBV cccDNA与血清HBV DNA定量呈正相关(r=0.304,P＜0.01)；肝组织HBV tDNA与血清HBV DNA定量呈正相关(r=0.341,P＜0.01)；(2)肝细胞内HBcAg定性检测阳性患者的血清HBV DNA定量明显高于阴性患者,且差异有统计学意义(P＜0.05)；肝细胞内HBcAg定性检测阳性患者与阴性患者的肝组织HBVcccDNA和HBVtDNA定量差异均无统计学意义和(P均＞0.05)；(3)肝细胞内HBsAg定性检测阳性患者的血清HBV DNA定量明显高于阴性患者,且差异有统计学意义(P＜0.05)；肝细胞内HBsAg定性检测阳性患者与阴性患者的肝组织HBV cccDNA和HBV tDNA定量差异均无统计学意义(P＞0.05)；(4) HBeAg(+)/抗-HBe(-)患者血清HBV DNA定量明显高于HBeAg( -)/抗-HBe(+)患者,且差异有统计学意义(P＜0.15)；HReAg(+)/抗-HBe( -)患者肝组织HBV cccDNA和HBV tDNA定量与HBeAg( -)/抗-HBe(+)患者比较差异均无统计学意义(均P＞0.05)；(5)肝组织HBV cccDNA、HBV tDNA以及血清HBV DNA三者与肝脏炎症活动度及纤维化程度均无显著相关性(P＞0.05).结论 (1)血清HBV DNA定量结果并不一定能完全反映患者肝组织中HBV cccDNA和HBV tDNA含量,尤其在血清HBV DNA＜500拷贝/mL时,肝组织中仍存在HBV cccDNA和HBV tDNA,且含量大小不等.(2)肝细胞内HBcAg定性检测阳性或者HBsAg定性检测阳性患者的血清HBV DNA定量均明显高于阴性患者；而两者的肝组织HBVcccDNA和HBV tDNA定量均没有显著差异；(3) HBeAg(+)/抗-HBe(-)患者血清HBV DNA定量明显高于HBeAg( -)/抗-HBe(+)患者,而两者的肝组织HBV cccDNA和HBV tDNA均没有显著差异；(4)肝组织HBV cccDNA、HBV tDNA及血清HBV DNA与肝脏炎症活动度和纤维化程度均无显著相关性.